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四大酵母培养基的配制

放大字体  缩小字体 发布日期:2016-04-06  浏览次数:540
核心提示:一、目的要求 了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。 学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄
 一、目的要求   
    了解合成培养基、半合成培养基和天然培养基的配制原理。   
学习和掌握麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的配制方法。   

二、基本原理   
    麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基,马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基,而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。   

三、实验材料   
(一)药品   
葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O,FeS04、琼脂。   
(二)仪器   
天平、高压蒸汽灭菌锅。   
(三)玻璃器皿   
移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。   
(四)其他物品   
药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。   

四、实验内容   
(一)麦芽汁培养基的配制   
1.培养基成分   
新鲜麦芽汁一般为10-15波林。   
2.配制方法   
    (1)用水将大麦或小麦洗净,用水浸泡6-12h,置于15℃阴凉处发芽,上盖纱布,每日早、中、晚淋水一次,待麦芽伸长至麦粒的两倍时,让其停止发芽,晒干或烘干,研磨成麦芽粉,贮存备用。   
    (2)取一份麦芽粉加四份水,在65℃水浴锅中保温3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如无蓝色出现,即表示糖化完全)。   
    (3) 糖化液用4-6层纱布过滤,滤液如仍混浊,可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清,加水20 m1,调匀至生泡沫,倒入糖化液中,搅拌煮沸,再过滤)。   
   (4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度,将滤液用水稀释到10-15波林,调pH至6.4。如当地有啤酒厂,可用未经发酵,未加酒花的新鲜麦芽汁,加水稀释到10-15波林后使用。   
    (5)如配固体麦芽汁培养基时,加入2%琼脂,加热融化,补充失水。   
    (6)分装、加塞、包扎。   
    (7)高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。   
(二)马铃薯葡萄糖培养基的配制   
1、培养基成分   
马铃薯                                             20g   
葡萄糖                                             2 g   
琼脂                                               1.5-2g   
水                                                 100ml   
自然pH                                                
    2.配制方法   
    (1)配制20%马铃薯浸汁  取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1000m1。80℃浸泡lh,用纱布过滤,然后补足失水至所需体积。100 Pa灭菌20 min。即成20%马铃薯浸汁,贮存备用。   
(2)配制时,按每100 m1马铃薯浸汁加入2g葡萄糖,加热煮沸后加入2g琼脂,继续加热融化并补足失水。   
    (3)分装、加塞、包扎。   
    (4)高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。   
  (三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制   
1.培养基成分   
黄豆芽                                             10g   
葡萄糖                                             5g   
琼脂                                               1.5-2g   
水                                                 100ml   
自然pH                                                 
    2.配制方法   
    (1)称新鲜黄豆芽10g,置于烧杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用纱布过滤,补足失水,即制成10%豆芽汁。   
(2)配制时,按每100 m1 10%豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g琼脂,继续加热融化,补足失水。   
    (3)分装、加塞、包扎。   
    (4)高压蒸汽灭菌  100 Pa灭菌20 min。   
(四)察氏(czapck)培养基的配制   
1.培养基成分   
蔗糖                                             3g   
NaN03                                           0.3g   
K2HP04                                                                0.1g   
KCl                                             0.05g   
MgSO4·7H2O                                     0.05 g   
FeS04                                                                     0.001 g   
琼脂                                           1.5-2g   
蒸馏水                                         100ml   
自然pH                                                    
2.配制方法   
(1)称量及溶化  量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中,分别称取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培养基加入1ml 0.1%的FeS04溶液。   
(2)定容  候药品全部溶解后,将溶液倒入量筒中,加水至所需体积。   
(3)加琼脂  加入所需量琼脂,加热融化,补足失水。   
(4)分装、加塞、包扎。   
(5)高压蒸汽灭菌 100 Pa灭菌20 min。   

五、实验报告内容   
记录你所配制培养基的名称及成分。
 
 
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