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微生物培养基使用中常出现的问题及解答

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-11-06  浏览次数:440
核心提示:1、培养基煮沸溶解后再高压灭菌,还是直接高压灭菌存在疑惑。拿麦康凯琼脂举个例子,溶解后灭菌,平板上没有不溶的结晶紫,没有
1、培养基煮沸溶解后再高压灭菌,还是直接高压灭菌存在疑惑。拿麦康凯琼脂举个例子,溶解后灭菌,平板上没有不溶的结晶紫,没有紫色的斑点;相对比未溶解灭菌的,平板上有结晶紫和紫色的斑点。所以正确的做法是先煮沸溶解后再高压灭菌。
2、培养基PH值为什么不在标准范围内?
其实出现这个情况的问题有很多种,大致我分为这么6大点:①质量不好(生产厂家出厂时PH就不正确)②灭菌问题(高压灭菌温度过高或灭菌时间过长,导致葡萄糖类焦化从而PH降低)③保存时间(超过保质期或结块)④水质出现问题(可以用去离子水、纯化水、蒸馏水不能用矿泉水、自来水)⑤保存温度(保存温度过高)⑥光线直射 总结本人认为以上6点都可能导致培养基PH出现偏差,如果出现此类问题,建议逐一排查,直到问题解决
3、培养基高压灭菌时为什么会焦化?
不少检验人员在实验时,发现经过灭菌的培养基有焦化现象,我认为引起此现象的主要原因有以下4点:①可能你灭菌的时候温度超过了121℃(正常115-116℃20min即可)②灭菌时间过长③培养基在容器中装的太多(不要超过容器容量的80%)④灭完菌的培养基在高温环境中保存的时间过长,这些都会导致培养基发生焦化现象
4、培养基PH怎么测定?
通常分两种情况:①对于无需高压灭菌的培养基,先煮沸溶解后再冷却至25℃时,测定其PH值(固体培养基至少测2个点,取其平均值)②对于需要高压灭菌的培养基,高压灭菌后,冷却至25℃测其PH(固体培养基至少测2个点,取其平均值)
5、含琼脂培养基在倒平板为什么有时候不凝固或凝固不好?
针对以上情况,我做了分析:①针对需要高压灭菌的培养基,倒平板时候要先摇匀(因为琼脂分子量比较大,在冷却过程中容易沉淀到底部,导致琼脂分散不均匀)②针对无需高压灭菌的培养基,一次煮沸溶解后不能直接倒平板,应重复煮沸溶解3-5次(因为一次不能确保琼脂完全溶解)
6、为什么同一品牌的不同批号,粉末颜色有差别?
分析可能有3个原因:①此培养基成分含有染料或指示剂②不同批次粉末培养基含水量不同,一般要求≤6%,含水量越高,颜色越深③加工时球磨时间越长颜色越深
此次分享,主要是对微生物培养基使用这块会遇到的常见问题进行简单分析,希望通过短短几行字,能够帮助广大在实验中出现过此类问题的同仁,其中若有不对的地方忘诸位指正,谢谢! 
 
 
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